Terapia epigénetica (crotonato) en Enfermedad Renal

Video obtenido de: https://youtu.be/ZNwIYJ9YMdE?si=r4o0Q0Mur7UxSNww   Imagen obtenida de: https://genotipia.com/genetica_medica_news/causas-geneticas-enfermedad-renal-cronica/  

Tipo de Edición: In vivo y somática. La modificación se realiza directamente dentro del cuerpo del paciente (in vivo), y afecta a las células del cuerpo sin alterar las células germinales (óvulos o espermatozoides), por lo tanto no se hereda.

Dirigido hacia: 

Se enfoca en regular genes específicos en las células renales, como:

• - PGC1α y SIRT3, que protegen las mitocondrias y reducen el daño celular.
• - CCL2, un gen que promueve la inflamación.

Dirigido por: Modificación epigenética de histonas tipo crotonilación (Kcr), inducida mediante suplementación sistémica de crotonato.

Órgano a tratar:  Riñón, específicamente túbulos renales.

Vía de administración:  Sistémica, mediante suplementación con crotonato.

Resultados a corto plazo: Aumento de la crotonilación de histonas, aumento de la expresión de genes protectores (PGC1α, SIRT3), disminución de CCL2.

Resultado a mediano plazo: Protección contra la lesión renal aguda (AKI) inducida por sustancias nefrotóxicas, con mejoría funcional.

Resultado a largo plazo: Prevención de la transición AKI → enfermedad renal crónica (ERC) y preservación de la función renal.

REFERENCIAS:

• Martinez-Moreno JM, Fontecha-Barriuso M, Martín-Sánchez D, Sánchez-Niño MD, Ruiz-Ortega M, Sanz AB, et al. The contribution of histone crotonylation to tissue health and disease: Focus on kidney health. Front Pharmacol [Internet]. 2020;11:393. Disponible en: http://dx.doi.org/10.3389/fphar.2020.00393

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Terapia Celular con Células Madre Mesenquimales Autólogas en Osteoartritis de Rodilla

Video obtenido de: https://youtu.be/eL8UzNeRKEA?si=TDP6K8pjvWitbmdL

• Tipo de Stem Cell
• Se usaron células madre mesenquimales (MSC) obtenidas de la médula ósea del propio paciente (autólogas), conocidas por su capacidad para regenerar cartílago y reducir la inflamación.
• Método de obtención
• Las MSC se obtuvieron mediante aspiración de médula ósea (de la cresta ilíaca), y luego fueron cultivadas en laboratorio para aumentar su número antes de ser usadas.
• Vía de administración
• Las células fueron aplicadas por inyección intraarticular directamente en la rodilla, lo cual es una vía parenteral que permite actuar localmente sobre el tejido dañado. Se administró una única dosis de aproximadamente 10 a 100 millones de BM‑MSC por rodilla, y no se reportaron eventos adversos graves durante el periodo.
• Resultados a corto plazo (1 año)
• Reducción importante del dolor (VAS bajó de 4.4 a 1.8) y mejoría funcional (WOMAC aumentó de 18 a 32), con imágenes que mostraron reparación parcial del cartílago.
• Mediano plazo (3 años)
• Los efectos positivos se mantuvieron estables, sin complicaciones ni deterioro funcional significativo.
• Largo plazo (≥ 5 años)
• Los pacientes seguían mejor que antes del tratamiento y la progresión de la osteoartritis fue más lenta en las rodillas tratadas.

REFERENCIAS

• Wiggers, T. G., Winters, M., Van den Boom, N. A., Haisma, H. J., & Moen, M. H. (2021). Autologous stem cell therapy in knee osteoarthritis: a systematic review of randomised controlled trials. British Journal of Sports Medicine, 55(20), 1161–1169.Disponible en: Autologous stem cell therapy in knee osteoarthritis: a systematic review of randomised controlled trials - PubMed

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ADN RECOMBINANTE

ADN recombinante artificial:

• El factor VIII recombinante, utilizado para tratar la hemofilia A. Este se obtiene insertando el gen del factor VIII humano en células cultivadas (como CHO, células de ovario de hámster chino), que luego producen la proteína funcional en grandes cantidades y sin riesgo de infecciones virales.

Imagen obtenida de: https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Func-hemoderivados.com.ar%2Fproject%2Ffactor-viii-antihemofilico-unc%2F&psig=AOvVaw0lRDR9PADewNWr13kx-lxD&ust=1752516783941000&source=images&cd=vfe&opi=89978449&ved=0CBQQjRxqFwoTCLjUqfS3uo4DFQAAAAAdAAAAABAE

Ácidos nucleicos recombinantes naturales:

• En la naturaleza, Helicobacter pylori recombina activamente genes mediante transformación natural, lo que favorece su adaptación al huésped. Así, tanto la biotecnología como los mecanismos evolutivos aprovechan la recombinación genética para crear nuevas funciones.

Imagen obtenida de: https://lh4.googleusercontent.com/proxy/_EJy_SFp3OEyYZPOt1Xgd_cykWDKG2K6PmiEKTKWAP7Disrr8OL0Y525PyWI1tUyKkmO3slig5SI2Mp0xY65UzPAx_0YbFBaSk0LRK4FkwwCkpVmygqVcXkSqhnmpenjAO9YjSIwr85dkpthkQomaA

REFERENCIAS:

1. Resultados clínicos de la profilaxis con concentrados de factor VIII recombinante de vida media extendida en personas con hemofilia A - Universidad de Zaragoza Repository [Internet]. Universidad de Zaragoza. 2023 [citado el 13 de julio de 2025]. Disponible en: https://zaguan.unizar.es/record/155123

   

2. Páramo JA. Tratamiento de la hemofilia: de la terapia sustitutiva a la terapia génica. Med Clin (Barc) [Internet]. 2021;157(12):583–7. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.medcli.2021.04.031

   

3. Tokuda M, Shintani M. Microbial evolution through horizontal gene transfer by mobile genetic elements. Microb Biotechnol [Internet]. 2024;17(1):e14408. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1111/1751-7915.14408

   

5. Kogay R, Wolf YI, Koonin EV. Defence systems and horizontal gene transfer in bacteria. Environ Microbiol [Internet]. 2024;26(4):e16630. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1111/1462-2920.16630

   

6. Hermans C, Mancuso ME, Nolan B, Pasi KJ. Recombinant factor VIII Fc for the treatment of haemophilia A. Eur J Haematol [Internet]. 2021;106(6):745–61. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1111/ejh.13610

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Técnica de hibridación en Leptospirosis

Video disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=-OIz8QAIm24&pp=ygVAdGVuaWNhIHNvdXRoZXJuIGJsb3QgY29tbyB0w6ljbmljYSBkZSBoaWJyaWRhY2nDs24gbGVwdG9zcGlyb3Npcw%3D%3D

• La técnica de Southern blot permite detectar ADN de Leptospira interrogans. Primero, se amplifican simultáneamente dos regiones génicas mediante PCR: una correspondiente al gen lipL32 (279 pb) y otra al gen del ARN 16S (430 pb), utilizando cebadores específicos para cada uno. Luego, el ADN amplificado se somete a la técnica de Southern blot, donde se transfiere a una membrana y se hibrida con una sonda sintética complementaria al gen lipL32, marcada con quimioluminiscencia o fluoresceína. Esta fase adicional permite una sensibilidad elevada, logrando detectar entre 1 a 10 células patógenas incluso en muestras complejas. En ensayos con ambas sondas, la señal se intensifica específicamente al unirse al fragmento del gen lipL32, confirmando la presencia del patógeno. 

 REFERENCIAS: 

• Podgoršek D, Ružić-Sabljić E, Logar M, Pavlović A, Remec T, Baklan Z, et al. Evaluation of real-time PCR targeting the lipL32 gene for diagnosis of Leptospira infection. BMC Microbiol [Internet]. 2020;20(1):59. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1186/s12866-020-01744-4

• Ahmed AA, Goris MGA, Meijer MC. Development of lipL32 real-time PCR combined with an internal and extraction control for pathogenic Leptospira detection. PLoS One [Internet]. 2020;15(11):e0241584. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33137154/

• Chirathaworn C, Janwitthayanan W, Suputtamongkol Y, Poovorawan Y. Leptospira collagenase and LipL32 for antibody detection in leptospirosis. J Immunol Methods [Internet]. 2021;499(113168):113168. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.jim.2021.113168

• Orlando SA, Mora-Jaramillo N, Paredes-Núñez D, Rodriguez-Pazmiño AS, Carvajal E, León Sosa A, et al. Leptospirosis outbreak in Ecuador in 2023: A pilot study for surveillance from a One Health perspective. One Health [Internet]. 2024;19(100948):100948. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.onehlt.2024.100948

   

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Prueba PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) para el Dengue.

Video obtenido de: https://www.youtube.com/watch?v=8JFh0bTq_sw&pp=ygUXcHJ1ZWJhIHBjciBlbiBlbCBkZW5ndWU%3D

•  La prueba PCR utilizada para detectar el virus del dengue en Ecuador se basa en el análisis de muestras de suero, recolectadas durante la fase aguda de la enfermedad. El proceso inicia con la extracción del ARN viral mediante lisis celular y purificación con columnas de sílica o perlas magnéticas. Luego se emplea una RT-PCR en tiempo real (RT-qPCR), que combina transcriptasa reversa para convertir el ARN en ADNc y una polimerasa para amplificarlo. Los genes diana amplificados incluyen NS5, NS3, cápside y la región 3'UTR, que permiten identificar y diferenciar los serotipos virales. El resultado puede ser cualitativo, si solo se determina presencia o ausencia del virus, o cuantitativo, si se interpreta el valor de Ct para estimar la carga viral. 

REFERENCIAS:

1. Pérez, C. R., Martinez, M., & Ojeda, R. F. O. PCR como técnica molecular más utilizada en el diagnóstico del virus del dengue. Revisión sistemática: PCR as the most widely used molecular technique in the diagnosis of dengue virus. Systematic review. Latam: revista latinoamericana de Ciencias Sociales y Humanidades [Internet]. 2023 [citado el 7 de junio de 2025];4. Disponible en: https://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=9585677

   

2.Tian R, Yan H, Jiang Y, Wu A, Li L, Yang Z, et al. Detection and typing of dengue virus by one-step RT-PCR-based high-resolution melting assay. Virus Genes [Internet]. 2022;58(4):319–26. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1007/s11262-022-01906-8

   

3.Tandel K, Kumar M, Bhalla GS, Shergill SPS, Swarnim V, Sahai K, et al. Detection of dengue virus serotypes by single-tube multiplex RT-PCR and multiplex real-time PCR assay. Med J Armed Forces India [Internet]. 2022;78(3):333–8. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.mjafi.2021.09.001

   

4. Stittleburg V, Rojas A, Cardozo F, Muñoz FM, Asturias EJ, Olson D, et al. Dengue virus and yellow fever virus detection using reverse transcription-insulated isothermal PCR and comparison with real-time RT-PCR. Am J Trop Med Hyg [Internet]. 2020;103(1):157–9. Disponible en: http://dx.doi.org/10.4269/ajtmh.19-0892

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Técnica de secuenciación en la tuberculosis

Video obtenido de:https://www.youtube.com/watch?v=kbAVJEvcn1U&pp=ygUtU0VDVUVOQ0lBIERFTCBHRU5PTUEgQ09NUExFVE8gRU4gVFVCRVJDVUxPU0lT

• La secuenciación del genoma completo (WGS) es una técnica molecular que analiza la estructura primaria del ADN de Mycobacterium tuberculosis a nivel de nucleótidos. Implica la extracción del ADN genómico, su fragmentación, y la amplificación mediante PCR para generar bibliotecas que luego se leen con plataformas como Illumina. Esta técnica permite identificar mutaciones puntuales, inserciones o deleciones en genes asociados a resistencia antibiótica, como katG o rpoB. A nivel celular, revela adaptaciones genéticas del patógeno que le permiten evadir tratamientos. Su aplicación mejora la comprensión de los mecanismos moleculares de resistencia. En Ecuador, es una herramienta prometedora para combatir la tuberculosis multirresistente.

REFERENCIAS:

• Liu D, Huang F, Zhang G, He W, Ou X, He P, et al. Whole-genome sequencing for surveillance of tuberculosis drug resistance and determination of resistance level in China. Clin Microbiol Infect [Internet]. 2022;28(5):731.e9-731.e15. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1016/j.cmi.2021.09.014

• Li J, Yang T, Hong C, Yang Z, Wu L, Gao Q, et al. Whole-genome sequencing for resistance level prediction in multidrug-resistant tuberculosis. Microbiol Spectr [Internet]. 2022;10(3):e0271421. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1128/spectrum.02714-21

• Acharya B, Acharya A, Gautam S, Ghimire SP, Mishra G, Parajuli N, et al. Advances in diagnosis of Tuberculosis: an update into molecular diagnosis of Mycobacterium tuberculosis. Mol Biol Rep [Internet]. 2020;47(5):4065–75. Disponible en: http://dx.doi.org/10.1007/s11033-020-05413-7

•  Mariner-Llicer, C., Saavedra Cervera, B., Mambuque, E., Gomes, N., Munguambe, S., Villamayor, L., ... & García-Basteiro, A. L. Aplicaciones de la secuenciación del genoma completo de Mycobacterium tuberculosis para la predicción de resistencias a antibióticos en muestras de Mozambique [Internet]. Csic.es. 2023 [citado el 1 de junio de 2025]. Disponible en: https://digital.csic.es/handle/10261/339890

   

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Alteraciones de la epigénetica en el cáncer gástrico

Video disponible en: https://youtu.be/KQ5RdsHAgEw?si=-MgpjRgGyUlJtd7V

• Una alteración epigenética clave en el cáncer gástrico es la hipermetilación del promotor del gen CDH1, que codifica la proteína E-cadherina, esencial para la adhesión celular. Este silenciamiento epigenético reduce la expresión de E-cadherina, facilitando la diseminación de células tumorales y la progresión del cáncer gástrico. Estudios han identificado que hasta el 50% de los casos de cáncer gástrico difuso presentan hipermetilación en el promotor de CDH1 . Factores como la infección por Helicobacter pylori pueden inducir estas modificaciones epigenéticas, contribuyendo al desarrollo tumoral . Dado que estas alteraciones son potencialmente reversibles, representan objetivos prometedores para terapias epigenéticas dirigidas.

REFERENCIAS:

Vera, G. A. G., Tortorelli, E. S. R., Flores, P. A. C., Párraga, A. E. A., & Zambrano, J. C. D. La epigenética del cáncer gástrico: Evaluación de los cambios epigenéticos, su influencia en la carcinogénesis y respuesta al tratamiento. Ciencia Latina Revista Científica Multidisciplinar [Internet]. 2023 [citado el 24 de mayo de 2025];7(3):2779-2806. Disponible en: https://www.ciencialatina.org/index.php/cienciala/article/view/6377            Christodoulidis G, Koumarelas K-E, Kouliou M-N, Thodou E, Samara M. Gastric cancer in the era of epigenetics. Int J Mol Sci [Internet]. 2024;25(6). Disponible en: http://dx.doi.org/10.3390/ijms25063381  Fattahi S, Amjadi-Moheb F, Tabaripour R, Ashrafi GH, Akhavan-Niaki H. PI3K/AKT/mTOR signaling in gastric cancer: Epigenetics and beyond. Life Sci [Internet]. 2020;262(118513):118513. Disponible en:http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2020.118513

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