Micaela Francheska Sánchez Albán: Técnica de hibridación en Leptospirosis

La técnica de Southern blot permite detectar ADN de Leptospira interrogans. Primero, se amplifican simultáneamente dos regiones génicas mediante PCR: una correspondiente al gen lipL32 (279 pb) y otra al gen del ARN 16S (430 pb), utilizando cebadores específicos para cada uno. Luego, el ADN amplificado se somete a la técnica de Southern blot, donde se transfiere a una membrana y se hibrida con una sonda sintética complementaria al gen lipL32, marcada con quimioluminiscencia o fluoresceína. Esta fase adicional permite una sensibilidad elevada, logrando detectar entre 1 a 10 células patógenas incluso en muestras complejas. En ensayos con ambas sondas, la señal se intensifica específicamente al unirse al fragmento del gen lipL32, confirmando la presencia del patógeno.

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domingo, 15 de junio de 2025